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脂肪酸氧化在巨噬細(xì)胞極化中作用的探究

作者:admin 信息來源:達科為 日期:20210726 打印 字體:  
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細(xì)胞內(nèi)代謝在細(xì)胞發(fā)育分化和功能方面所起的調(diào)節(jié)作用已經(jīng)引起了研究者非常大的興趣。在巨噬細(xì)胞的研究中,經(jīng)典的M1型細(xì)胞的活化被發(fā)現(xiàn)依賴于糖酵解功能,而M2型巨噬細(xì)胞的極化近來被注意到似乎需要脂肪酸氧化(FAO)的作用。

脂肪酸氧化(Fatty Acid Oxidation,FAO)是指油脂水解產(chǎn)生的甘油和脂肪酸在供氧充足的條件下,可氧化分解生成二氧化碳和水,并釋放出大量能量供機體利用,過程可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及最后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O并釋放能量幾階段。脂肪酸氧化(FAO)需要肉堿?;D(zhuǎn)移酶(CPT)系統(tǒng),包括一個轉(zhuǎn)運體和兩個線粒體膜酶(CPT1和CPT2)。這個系統(tǒng)促進了長鏈脂肪酸進入線粒體基質(zhì)的運輸,在那里它們可以被代謝產(chǎn)生ATP。

位于線粒體外膜(OMM)上的CPT1和位于線粒體內(nèi)膜(IMM)上的CPT2在將長鏈脂肪酸以?;o酶A形式運輸?shù)骄€粒體基質(zhì)中的作用示意圖

 

為了評估脂肪酸氧化(FAO)在巨噬細(xì)胞中的功能,從野生型小鼠(control)和敲除編碼CPT2酶基因的小鼠(CPT2-M KO小鼠)體內(nèi)分別獲得骨髓來源的巨噬細(xì)胞(BMDMs)。野生型小鼠的BMDMs在加入脂肪酸后,基礎(chǔ)耗氧率(OCR)出現(xiàn)明顯的增加,加入CPT1酶抑制劑后,耗氧率升高現(xiàn)象消失。而KO小鼠在加入脂肪酸后,無論有沒有使用CPT1酶的抑制劑,耗氧率都沒有出現(xiàn)顯著的改變。所以正常的巨噬細(xì)胞是有執(zhí)行脂肪酸氧化的功能的,但是缺少CPT2或者抑制CPT1酶的巨噬細(xì)胞,細(xì)胞執(zhí)行脂肪酸氧化的功能缺失。
 

進一步評估M2型巨噬細(xì)胞的極化與脂肪酸氧化的關(guān)系。取兩組小鼠的BMDMs在體外進行M2的極化,分別加入IL-4培養(yǎng)后,收集兩組細(xì)胞,通過流式檢測M2巨噬細(xì)胞表面抗原CD301和CD206的含量發(fā)現(xiàn)WT和KO小鼠都出現(xiàn)了M2的極化,但是兩組小鼠M2含量并沒有出現(xiàn)顯著的差異。

在體內(nèi)誘導(dǎo)實驗中也發(fā)現(xiàn)了相同的結(jié)果。給WT小鼠分別注射PBS和IL-4c(IL-4重組蛋白和IL-4單抗混合試劑),KO組小鼠進行和WT一樣的處理。檢測兩組小鼠腹膜巨噬細(xì)胞的Arg1, Mgl2 和Retnla表達,兩組小鼠之間仍然沒有明顯的差異。
 

 

綜上,本次的實驗結(jié)果表明不管是否具備脂肪酸氧化功能的細(xì)胞,都能在體內(nèi)外的實驗中成功誘導(dǎo)M2型巨噬細(xì)胞。本次實驗結(jié)合之前的研究說明M2型細(xì)胞極化對脂肪酸氧化(FAO)的需求比之前所認(rèn)為的更加復(fù)雜。仍然需要更多的研究來證實脂肪酸氧化(FAO)在巨噬細(xì)胞極化中是否具有相關(guān)或因果作用。

 

脂肪酸氧化(FAO)檢測相關(guān)產(chǎn)品的介紹

試劑盒特點:

  • 檢測細(xì)胞和組織樣本中的FAO

  • 快速:整個時間耗時2h左右

  • 簡單:只需要3個組分三步操作即可完成實驗

  • 靈活:實驗不需要特定的儀器,結(jié)果在492nm的讀板儀即可讀取

 

試劑盒參考文獻:

NMR-based serum and urine metabolomic profile reveals suppression of mitochondrial pathways in experimental sepsis-associated acute kidney injury.(2021)

 

試劑盒驗證數(shù)據(jù):

脂肪酸氧化試驗:從健康的倉鼠心臟和與心力衰竭相關(guān)的TO2倉鼠模型心臟制備組織裂解物。裂解物用于測定和脂肪酸氧化水平

 

文章參考文獻:

Fatty acid oxidation in macrophage polarization.(2016)

Adipose fatty acid oxidation is required for thermogenesis and potentiates oxidative stress induced inflammation.(2015)

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