人妻无码中文字幕免费视频蜜桃,91成人 在线观看喷潮,国产欧美熟妇另类久久久,北条麻妃42部无码电影,中文字幕一区二区三区免费视频

您好,歡迎光臨達(dá)科為生物城!
免費(fèi)熱線電話 : 400 819 7199 (工作日:8:30 - 17:30) 收藏達(dá)科為生物城
當(dāng)前位置: 首頁 > 技術(shù)天地 > 技術(shù)專欄 > WB/IH/IP技術(shù) > 正文

免疫沉淀(IP)的常見問題及解答

作者:admin 信息來源:達(dá)科為 日期:20130718 打印 字體:  
分享到:

1. 用于一般免染的抗體是否都可以用作免疫沉淀實(shí)驗(yàn)? 
答:抗體的性質(zhì)對免疫沉淀實(shí)驗(yàn)影響很大。抗體不同,和抗原以及Protein G或Protein A的結(jié)合能力也就不同。所以一般免染能結(jié)合的抗體未必能用于IP反應(yīng)。 一般來說,多抗是沉淀反應(yīng)更好的選擇。另外,純化的單抗、腹水和雜交瘤上清液也可用于免疫沉淀。

2. 為什么溶解抗原的緩沖液中要加入一定量的蛋白酶抑制劑? 
答:從活性細(xì)胞裂解出來的樣品中,往往含有一定量的蛋白酶。為防止預(yù)檢測蛋白的分解,修飾,溶解抗原的緩沖液必須加蛋白每抑制劑,并且在低溫下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

3. 溶解抗原的緩沖液的配制需要注意什么? 
答:多數(shù)的抗原是細(xì)胞構(gòu)成的蛋白,特別是骨架蛋白,緩沖液必須要使其溶解。為此,必須使用含有強(qiáng)表面活性劑的緩沖液,盡管它有可能影響一部分抗原抗體的結(jié)合。另一面,如用弱表面活性劑溶解細(xì)胞,就不能充分溶解細(xì)胞蛋白。即便溶解也產(chǎn)生與其它的蛋白結(jié)合的結(jié)果,抗原決定族被封閉,影響與抗體的結(jié)合。

4. 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)應(yīng)如何把握抗體和緩沖液的比例? 
答:每次沉淀實(shí)驗(yàn)之前,考慮抗體/緩沖液的比例十分重要??贵w過少就不能檢出抗原,過多則就不能沉降在beads上,殘存在上清;緩沖劑太少則不能溶解抗原,過多則抗原被稀釋。具體比例視具體情況而定。

5. 免疫沉淀應(yīng)該如何配制細(xì)胞裂解液? 
答:適當(dāng)?shù)募?xì)胞裂解液的選擇取決于所要研究蛋白的特性。TritonX-100,NP40是非離子界面活性劑,作用溫和;DOC(sodium de-oxycholate),SDS是離子性的強(qiáng)活性劑。所以裂解液的配制時所用去污劑的種類和濃度以及鹽濃度等條件需實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行優(yōu)化。注意如果忘記加TritonX-100,只加DOC或SDS,可能使抗體完全失去活性。

微博名稱:達(dá)科為生物城
微博地址:
http://e.weibo.com/bjdakewe

微信二維碼:
北京達(dá)科為生物技術(shù)有限公司  京ICP備13014125號-1
全國免費(fèi)熱線:400 819 7199 (工作日:8:30 - 17:30) Email:bj_info@dakewe.net
聯(lián)系我們
© 2013 版權(quán)所有 北京達(dá)科為生物技術(shù)有限公司
亚洲欧美动漫偷拍 | 特级婬片A片AAA毛小雪 | 国产一级a毛一级a看免 | 国语对白91爽死我了 | 亚洲一区二区三区在线观 | 91精品久久久久久久久无码果冻 | 国产精品激烈高潮白浆 | 欧美高清五码在线观看免费 | 亚洲日本va中文字幕 | 91人妻无码一区二区三区 | 亚洲精品中文字幕无码 | 1000部啪啪毛片免费看 | 亚洲福利小短视频在线看看 | 一级婬片试看30分钟 | 30分钟免费婬片A片 黄色美女视频在线观看 | 国产精品久久久久无码 | 国产欧美自慰人人人一区 | 久久成人影院免费观看 | 欧美黄片免费在线观看 | 精品人妻伦一二三区春菊 | 免费黄色片在线视频 | 国产无遮挡AAA片爽爽 | 苍井そら50分钟无码流出 | 插美女在酒店免费网站视频 | 亚洲午夜精品一区二区三区他趣 | 亚洲精品久久久无码大乳老师 | 午夜网址日本欧美 | 国产精品乱码一区二区三区 | 东北少妇不戴套对白第一次 | 高清无码在线免费观看 | 黄色视频在线观看无码 | 久久夜色精品国产欧美乱极品 | 怡红院拍拍午夜影院 | 国模精品无码一区二区免费蜜桃 | 能看的亚洲黄色视频 | 国产无码高清视频日韩 | 国产乱妇无码大黄AA片 | 免费看的黄色视频在线观看 | 国产又大又黑又粗免费视频 | 女人18毛片A片一区二区三区 | 漂亮女大学一级毛片视频 |