人妻无码中文字幕免费视频蜜桃,91成人 在线观看喷潮,国产欧美熟妇另类久久久,北条麻妃42部无码电影,中文字幕一区二区三区免费视频

您好,歡迎光臨達(dá)科為生物城!
免費(fèi)熱線電話 : 400 819 7199 (工作日:8:30 - 17:30) 收藏達(dá)科為生物城
當(dāng)前位置: 首頁 > 技術(shù)天地 > 技術(shù)專欄 > WB/IH/IP技術(shù) > 正文

免疫沉淀(IP)的常見問題及解答

作者:admin 信息來源:達(dá)科為 日期:20130718 打印 字體:  
分享到:

1. 用于一般免染的抗體是否都可以用作免疫沉淀實(shí)驗(yàn)? 
答:抗體的性質(zhì)對免疫沉淀實(shí)驗(yàn)影響很大。抗體不同,和抗原以及Protein G或Protein A的結(jié)合能力也就不同。所以一般免染能結(jié)合的抗體未必能用于IP反應(yīng)。 一般來說,多抗是沉淀反應(yīng)更好的選擇。另外,純化的單抗、腹水和雜交瘤上清液也可用于免疫沉淀。

2. 為什么溶解抗原的緩沖液中要加入一定量的蛋白酶抑制劑? 
答:從活性細(xì)胞裂解出來的樣品中,往往含有一定量的蛋白酶。為防止預(yù)檢測蛋白的分解,修飾,溶解抗原的緩沖液必須加蛋白每抑制劑,并且在低溫下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

3. 溶解抗原的緩沖液的配制需要注意什么? 
答:多數(shù)的抗原是細(xì)胞構(gòu)成的蛋白,特別是骨架蛋白,緩沖液必須要使其溶解。為此,必須使用含有強(qiáng)表面活性劑的緩沖液,盡管它有可能影響一部分抗原抗體的結(jié)合。另一面,如用弱表面活性劑溶解細(xì)胞,就不能充分溶解細(xì)胞蛋白。即便溶解也產(chǎn)生與其它的蛋白結(jié)合的結(jié)果,抗原決定族被封閉,影響與抗體的結(jié)合。

4. 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)應(yīng)如何把握抗體和緩沖液的比例? 
答:每次沉淀實(shí)驗(yàn)之前,考慮抗體/緩沖液的比例十分重要??贵w過少就不能檢出抗原,過多則就不能沉降在beads上,殘存在上清;緩沖劑太少則不能溶解抗原,過多則抗原被稀釋。具體比例視具體情況而定。

5. 免疫沉淀應(yīng)該如何配制細(xì)胞裂解液? 
答:適當(dāng)?shù)募?xì)胞裂解液的選擇取決于所要研究蛋白的特性。TritonX-100,NP40是非離子界面活性劑,作用溫和;DOC(sodium de-oxycholate),SDS是離子性的強(qiáng)活性劑。所以裂解液的配制時所用去污劑的種類和濃度以及鹽濃度等條件需實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行優(yōu)化。注意如果忘記加TritonX-100,只加DOC或SDS,可能使抗體完全失去活性。

微博名稱:達(dá)科為生物城
微博地址:
http://e.weibo.com/bjdakewe

微信二維碼:
北京達(dá)科為生物技術(shù)有限公司  京ICP備13014125號-1
全國免費(fèi)熱線:400 819 7199 (工作日:8:30 - 17:30) Email:bj_info@dakewe.net
聯(lián)系我們
© 2013 版權(quán)所有 北京達(dá)科為生物技術(shù)有限公司
老女人任你躁久久久久久老妇 | 国产色情性黄 免费观看 | 成人黃色A片三級免费 | 国产mv在线观看免费 | 捆绑羞辱调教一二三区 | 在线综合 五月丁香av | 岛国黄色视频日本黄色视频 | 国产免费午夜精品理论A片 精品一区二区三区四区五区 | 波多野结衣一级片。 | 极品少妇勾引在线观看 | 爆乳巨大freesex国产精品 | 公天天吃我奶躁我的在线观看 | 免费看裸体美女 动漫 | 日韩中文字幕在线播放 | 一级婬片A片AAA毛片喷水漫画 | 3区4区黄色视频在线播放 | 国产三级兔费视频在线观 | 情趣网站在线观看永久 | 欧美性爱视频在线播放 | 免费全黄A片免费播放 | 四川女人高潮一级毛片 | 国产一级片自卫高潮出水 | 91久久精品无码一级毛片 | 伊人婷婷色五月色婷婷区 | 女人自慰一级看片88AV | 美女黄色视频在线观看 | 海角社区一级A片免费看 | 亲子乱伦一区二区三区 | 日批视频在线免费观看 | 西西4444www无码精品 | 久久99国产综合精品婷婷五月 | 国产视频一区二区三区四区 | 国产网站在线免费观看 | 精品久久AVA片免费播放 | 亚国产精品婷婷久久久ww | 久久伊人亚洲AV永久无码精品 | 农村妇女亂伦91山西 | 嫩草一区二区国产乱码99人妻 | 国产偷乱媱视频在线观看 | 婬荡交换乱人婬A片国产片男男 | 波多野结衣无码视频流出 |