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五分鐘完成粘末端連接?Fast-Link? DNA Ligation Kit,您值得擁有!

作者:admin 信息來源:達科為 日期:20190610 打印 字體:  
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酶是生物體非常重要的一類蛋白質(zhì),之前小達君給大家安利了Lucigen的RNase R(RNase R——RNase家族的“外貌協(xié)會成員”)和CircLigase? II ssDNA Ligase“單鏈DNA環(huán)化連接酶——CircLigase? II ssDNA Ligase”),今天繼續(xù)給大家介紹一款特色的DNA連接酶,完整的DNA連接試劑盒可以讓您在5min內(nèi)完成DNA重組,一起來了解下吧~

Fast-Link? DNA Ligation Kit

Fast-Link? DNA Ligation Kit使用了高質(zhì)量的連接酶 (Fast-Link T4 DNA Ligase), 可提供快速高效的DNA連接,粘末端的連接可在室溫5分鐘內(nèi)完成。另外,在轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞前,與其他連接酶相比,F(xiàn)ast-Link? DNA Ligation Kit的連接產(chǎn)物不需要脫鹽,操作更簡便。


應(yīng)用

★ PCR產(chǎn)物的平末端和TA克隆

★ 測序接頭與平末端的連接

★ 基因組DNA的克隆和亞克隆

★ BAC/fosmid文庫構(gòu)建

★cDNA克隆

★ 接頭連接

Type of End

Ligation Time

% White Colonies

Recombinants per μg DNA

Overhang

5 min.

93

2.0 x 106

Blunt

15 min.

71

4.4 x 105

PCR product with 3′-A overhang

1 hr.

68

1.2 x 104

表1    Fast-Link?連接不同產(chǎn)物的測試數(shù)據(jù)


實驗結(jié)果



圖1. 使用Fast-Link? Kit粘末端連接的過程

按標準連接反應(yīng)使用2U Fast-Link? ligase進行Lambda Hind III markers連接(泳道2-6). 泳道M, 1-kb ladder;泳道1,無酶對照;泳道2-6, 分別為5 min, 15 min, 30 min, 1 hr, 2 hr連接結(jié)果。  


圖2. 使用Fast-Link? Kit平末端連接過程

pUC 19 DNA用Pvu II消化,然后按標準連接反應(yīng)使用2U Fast-Link? ligase進行連接(泳道1-6). 泳道 M,1-kb ladder;泳道1,無酶對照;泳道2-6, 分別為5 min, 15 min, 30 min, 45min, 1 hr連接結(jié)果。


產(chǎn)品優(yōu)勢

★ 室溫五分鐘完成粘末端連接 (圖1)

★ 室溫15分鐘完成平末端連接 (圖2)

★在16℃下連接PCR產(chǎn)物(A端突出),在1小時內(nèi)完成,高連接效率(表1)

★在轉(zhuǎn)入大腸菌感受態(tài)細胞前,快速連接反應(yīng)不需要脫鹽處理

★ 進行BAC連接,插入> 100 kb可在4小時內(nèi)進行,而不像其它的連接酶需要過夜反應(yīng)

產(chǎn)品內(nèi)容物

Fast-Link DNA Ligase (2 U/μL)

Fast-Link? 10X Ligation Buffer

ATP (10 mM)

說明書鏈接(請點擊閱讀原文):https://www.lucigen.com/docs/manuals/MA086E-Fast-Link-Kits.pdf

產(chǎn)品信息

分類

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

網(wǎng)站報價

品牌

依賴ATPDNA連接酶

LK0750H

FAST-LINK? DNA LIGATION KIT

50 rxns

¥1,937

Lucigen

LK6201H

FAST-LINK? DNA LIGATION KIT

100 rxns

¥3,172

Lucigen

依賴NAD+DNA連接酶

A0102K

Ampligase? DNA Ligase with Buffer

2,500 U @ 100 U/μl

¥3,406

Lucigen

A0110K

Ampligase? DNA Ligase without Buffer

10,000 U @ 100 U/μl

¥8,827

Lucigen

A1905B

Ampligase? 10X Reaction Buffer

5 ml

¥858

Lucigen

A3202K

Ampligase? DNA Ligase with Buffer

2,500 U @ 5 U/μl

¥3,601

Lucigen

A3210K

Ampligase? DNA Ligase without Buffer

10,000 U @ 5 U/μl

¥9,009

Lucigen

A32750

Ampligase? DNA Ligase with Buffer

750 U @ 5 U/μl

¥1,651

Lucigen

A8101

Ampligase? DNA Ligase Kit

1,000 U @ 5 U/μl

¥2,327

Lucigen


品牌介紹

美國Lucigen公司成立于1998年,提供各類用于分子生物學(xué)相關(guān)產(chǎn)品,可以使研究者成功克隆較難克隆的基因,其在2016年收購了Illumina旗下Epicentre產(chǎn)品線。目前產(chǎn)品類別主要包括:體外轉(zhuǎn)錄、基因克?。˙AC克隆試劑盒)、感受態(tài)細胞(TG1噬菌體文庫構(gòu)建感受態(tài))、體外擴增、轉(zhuǎn)座子突變、蛋白表達、文庫構(gòu)建等。


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